Ат к миелину igg 1 10 что значит

Ат к миелину igg 1 10 что значит

Определение в крови аутоантител к антигенам миелина, используемое для диагностики, оценки прогноза и контроля лечения рассеянного склероза и других демиелинизирующих заболеваний центральной нервной системы.

Аутоантитела к антигенам миелина

Антитела к миелину

Myelin specific autoantibodies

Непрямая реакция иммунофлюоресценции.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Общая информация об исследовании

Демиелинизирующие заболевания центральной нервной системы – это гетерогенная группа болезней, характеризующихся разрушением миелиновой оболочки (демиелинизацией) нервных волокон головного и спинного мозга. Наиболее ярким представителем этой группы заболеваний является рассеянный склероз. В настоящий момент демиелинизирующие заболевания рассматриваются как аутоиммунные заболевания, преимущественно опосредованные Т-клетками, однако в последнее время появляются новые данные и о роли гуморального ответа, опосредованного аутоантителами к антигенам ЦНС. Наиболее хорошо изучены антитела к антигенам миелина – белково-липидной оболочки аксонов нейронов. Определение в крови аутоантител к антигенам миелина может использоваться для диагностики, оценки прогноза и контроля лечения рассеянного склероза и других демиелинизирующих заболеваний ЦНС. Различают несколько вариантов антител к антигенам миелина:

1. Антитела к гликопротеину миелина олигодендроцитов (anti-myelin oligodendrocyte glycoprotein, Anti-MOG)

На долю белка под названием гликопротеин миелина олигодендроцитов (MOG) приходится всего лишь 0,05 % всех белков в составе миелина. MOG, однако, располагается во внешнем слое миелиновой оболочки, что делает его легкодоступным антигеном для атаки аутоантителами. В действительности MOG является мишенью как для гуморального, так и для клеточного аутоиммунного ответа. Физиологическая роль MOG до конца неясна, хотя, по-видимому, он необходим для «склеивания» миелиновых волокон. MOG также способен связывать C1q фрагмент комплемента и, таким образом, участвовать в регуляции классического пути активации комплемента. Показано, что антитела к MOG непосредственно приводят к демиелинизации, то есть обладают энцефалитогенными свойствами. Важно отметить, что антиген MGO имеет несколько конформаций, различающихся между собой по степени иммуногенности. Наиболее выраженную демиелинизацию вызывают антитела, направленные против гликозилированных эпитопов MGO.

Антитела к MGO обнаруживаются в крови и спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом, но также могут быть выявлены и у здоровых людей. Интересно, что анти-MGO чаще обнаруживаются в случаях детского рассеянного склероза (у детей младше 10 лет).

Некоторыми исследованиями доказано, что уровень анти-MGO отражает активность рассеянного склероза и поэтому может быть использован для прогноза и контроля лечения заболевания. Также показано, что здоровые люди, в крови которых обнаруживаются анти-MGO, имеют несколько повышенный риск развития рассеянного склероза в будущем.

2. Антитела к основному белку миелина (anti-myelin basic protein, anti-MBP)

Основной белок миелина (MBP) – это один из главных компонентов внутреннего слоя миелиновой оболочки. Располагаясь внутри, MBP менее доступен для аутоантител при условии, что миелиновое волокно не повреждено. Антитела к MBP обнаруживаются в повышенной концентрации в крови и спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом. В отличие от анти-MGO, анти-MBP не обладают энцефалитогенными свойствами и их роль в патогенезе рассеянного склероза не ясна. Некоторыми учеными показано, что анти-MBP в сочетании с анти-MGO могут быть использованы в качестве маркеров ранней трансформации клинического изолированного синдрома (КИС) в рассеянный склероз.

3. Антитела к миелин-ассоциированному гликопротеину (anti-myelin associated glycoprotein, anti-MAG)

На долю белка под названием миелин-ассоциированный гликопротеин (MAG) приходится около 3 % всех белков в составе миелина. Однако MAG, как и гликопротеин миелина олигодендроцитов MOG, располагается во внешнем слое миелиновой оболочки и поэтому доступен для аутоантител. Анти-MAG хорошо известен в качестве клинико-лабораторного маркера периферических нейропатий, связанных с моноклональными гаммапатиями и другими лимфопролиферативными заболеваниями. Показано, что эти аутоантитела также обнаруживаются у пациентов с рассеянным склерозом и могут быть связаны с прогрессированием этого заболевания.

4. Антитела к галактоцереброзидазе (anti-galactocerebrosidase, anti-Galc)

Галактоцереброзидаза (Galc) – это самый главный липидный компонент миелина, на долю которого приходится около 30 % миелина. Так же как и анти-MGO, анти-Galc способны непосредственно приводить к демиелинизации. Анти-Galc более характерны для ремитирующего-рецидивирующего варианта рассеянного склероза и не обнаруживаются у здоровых лиц. Так как анти-Galc нехарактерны для ранних стадий рассеянного склероза (клинически изолированный синдром) и чаще выявляются при прогрессировании заболевания, некоторыми учеными предложено использовать этот маркер для определения стадии заболевания.

5. Антитела к протеолипидному протеину (anti-proteolipid protein, anti-PLP)

Протеолипидный протеин (PLP) – еще один из основных компонентов миелина. Антитела к PLP обнаруживаются в повышенной концентрации в крови и спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом.

6. Антитела к фосфатидилхолину (anti-phosphatidylcholine)

В составе олигоклональных иммуноглобулинов, определяемых в ликворе больных рассеянным склерозом, могут быть обнаружены специфические антитела класса IgM, избирательно взаимодействующие с фосфатидилхолином. Эти аутоантитела связаны с более агрессивным течением болезни и поэтому могут использоваться в качестве прогностического маркера.

Следует еще раз подчеркнуть, что антитела к антигенам миелина неспецифичны для рассеянного склероза. Они также обнаруживаются и при некоторых других демиелинизирующих заболеваниях (например, при болезни Марбурга и остром диссеминированном энцефаломиелите) и в постинсультном состоянии. По этой причине их используют в качестве дополнительных клинико-лабораторных маркеров рассеянного склероза и других заболеваний центральной нервной системы.

Для чего используется исследование?

Когда назначается исследование?

Что означают результаты?

Титр: Что может влиять на результат?

45 Диагностика рассеянного склероза (изоэлектрофокусирование олигоклонального IgG в ликворе и сыворотке)

Кто назначает исследование?

Невролог, врач общей практики.

Источник

Совершенствование алгоритма диагностики демиелинизирующих полиневропатий

Вклинике инфекционных болезней демиелинизирующие заболевания нервной системы являются одной из актуальных проблем, вследствие преобладания тяжелых форм, высоких показателей инвалидизации и летальности

Вклинике инфекционных болезней демиелинизирующие заболевания нервной системы являются одной из актуальных проблем, вследствие преобладания тяжелых форм, высоких показателей инвалидизации и летальности [1, 2, 3].

В последние годы значительно возрос интерес к поражениям периферической нервной системы, связанным с инфекционной патологией, что обусловлено тенденцией к увеличению частоты этих поражений и изменением характера их течения. Поражения нервной системы, развивающиеся во время или после перенесенных вирусных и бактериальных инфекций, встречаются достаточно часто [1, 4].

Среди приобретенных аутоиммунных демиелинизирующих полиневропатий (ДПНП) выделяют синдром Гийена–Барре (СГБ) и хроническую воспалительную демиелинизирующую полиневропатию (ХВДП).

Частота встречаемости СГБ, по различным данным, варьирует от 0,4 до 4,0 случаев на 100 тыс. населения ежегодно и в среднем составляет 1,5–2 случая на 100 тыс. населения [5, 6]. В России, как у детей, так и у взрослых, этот показатель составляет 0,6–1,7 на 100 тыс. населения. Заболевание не имеет сезонных колебаний, встречаясь во всех возрастных группах, с тенденцией увеличения заболеваемости с возрастом. Летальность при СГБ, по данным разных авторов, колеблется от 1% до 18%, а среди лиц с тяжелыми формами — от 5% до 33%. ХВДП встречается в любом возрасте, с пиком заболеваемости в возрастной группе 50–60 лет. В год регистрируется 0,15 случая ХВДП на 100 тыс. населения [5, 7].

Синдром Гийена–Барре — одно из наиболее тяжелых заболеваний периферической нервной системы, в 75–90% всех случаев проявляющееся в виде острой воспалительной демиелинизирующей полиневропатии (ОВДП). Гораздо реже (5–15% случаев) встречаются острые моторная (ОМАН) и сенсорно-моторная аксональные невропатии (ОМСАН). Наиболее редкой формой СГБ (3%) является синдром Миллера–Фишера, характеризующийся офтальмоплегией, мозжечковой атаксией и арефлексией при слабовыраженных парезах [5, 7, 8].

Клиническая картина синдрома Гийена–Барре характеризуется нарушением двигательных, чувствительных и вегетативных функций, сухожильной гипо- или арефлексией и болевым синдромом. Черепные нервы при синдроме Гийена–Барре поражаются в 50–90% случаев [5, 7].

В течении классического СГБ выделяют три периода: прогрессирование — нарастание неврологических нарушений в течение 3–4 недель, плато (стабилизация) — длится в среднем 10–14 дней, восстановление — длительность варьирует в широких пределах (от нескольких недель до нескольких месяцев, иногда до 1–2 лет) [5, 7].

При ХВДП, в отличие от СГБ, отмечается более медленное развитие клинической симптоматики (8 недель и более) [9, 10].

Этиология и патогенез синдрома Гийена–Барре до конца не известны. Предполагается, что в основе заболевания лежат аутоиммунные механизмы, где роль пускового фактора отводится микроорганизмам [4, 5, 6, 11]. Основной целью иммунных атак при ОВДП являются шванновские клетки и миелин. В развитии патологических изменений в нервах принимают участие как клеточные, так и гуморальные механизмы. Роль последних особенно велика. При ОВДП под действием тех или иных патогенов происходят активация антиген-специфичных Т- и В-клеток; появление циркулирующих антиганглиозидных или антигликолипидных антител; развитие местных клеточных воспалительных реакций, активация комплемента и отложение мембранолитического атакующего комплекса на миелиновой оболочке периферических нервов в области перехватов Ранвье; начинается и бурно нарастает инвазия миелиновой оболочки нервов сенсибилизированными макрофагами [5, 7].

Также у больных нейропатиями обнаруживаются антитела к различным ганглиозидам. В частности, аутоантитела к ганглиозидам (GM1, GD1а, GD1b и GQ1b), входящим в состав мембран клеток нервной системы и миелиновой оболочки, регистрируются при различных формах СГБ. Показана ассоциация антител к GM1 с острой моторной аксональной нейропатией, анти-GD1b — с сенсорными нейропатиями, а анти-GQ1b — с синдромом Миллера–Фишера [12, 13, 14]. Однако на сегодняшний день патогенетическое участие и диагностическая значимость исследованных антител остаются не доказанными [1, 9].

При ХВДП в сыворотке крови больных выявляются разные классы аутоантител к GM1 (IgG — в 23%, IgA — в 14% и IgM — в 7% случаев). Существенную роль в развитии демиелинизации при ХВДП играют макрофаги, отслаивающие миелин, что приводит к его дегенерации. В очагах воспаления обнаруживают СD4+- и СD8+ лимфоциты. На экспериментальных моделях демиелинизации показано, что Т-клетки накапливаются в периваскулярных пространствах и разрушают гематоневральный барьер. В конечном итоге циркулирующие антитела к миелину и/или компоненты комплемента проникают в эндоневральное пространство, что заканчивается демиелинизацией [7, 10, 13, 14].

Считается, что в основе СГБ лежит патофизиологический механизм, определяющийся в основном нарушениями гуморального иммунитета, тогда как в развитии ХВДП основная роль отводится нарушениям клеточного иммунитета [5, 9, 12].

Несмотря на достижения в понимании отдельных механизмов патогенеза всех ДПНП, которые послужили созданию новых диагностических тестов, данные, приведенные выше, показывают, что «универсального» маркера для каждого из заболеваний, входящих в гетерогенную группу демиелинизирующих, до сих пор не найдено.

Недавно разработанные постгеномные методы анализа и, в частности, протеомные технологии, для выявления в сыворотке крови новых маркеров различных заболеваний, были нацелены в основном на поиск онкомаркеров. В последнее время активно используется метод выделения из плазмы и сыворотки крови репрезентативных наборов пептидов при помощи высокопроизводительных, легко поддающихся автоматизации способов фракционирования на основе различных вариантов хроматографии с последующей регистрацией выделенных пептидов времяпролетной МАЛДИ масс-спектрометрией [15, 16, 17, 18, 19, 20, 21]. В литературе описаны примеры успешного применения этого метода для выявления различий между сывороткой крови пациентов с раком желудка, прямой кишки, простаты, гепатоклеточной карциномы, эндометрия или других видов онкологических заболеваний и сывороткой крови здоровых людей [22, 23, 24, 25].

При этом исследования, направленные на выявление маркеров демиелинизирующих заболеваний нервной системы, единичны и проводятся преимущественно зарубежными исследователями.

Таким образом, представленный анализ данных литературы показал, что выбранная проблема является чрезвычайно актуальной, прежде всего, по своим отдаленным, но довольно тяжелым неврологическим последствиям, развитие которых связано с несвоевременным распознаванием описанной патологии. В связи с этим создание диагностического алгоритма и критериев прогнозирования демиелинизирующих заболеваний нервной системы, разработка простого и доступного широкой медицинской практике метода диагностики этой патологии способствовали бы своевременному распознаванию и, следовательно, эффективной терапии подобных нежелательных последствий инфекционных процессов различной этиологии.

Материал и методы исследования

Согласно разработанному протоколу комплексного клинико-лабораторного обследования пациентов с демиелинизирующими полиневропатиями, включающему помимо общепринятых методов исследования развернутое иммунологическое и протеомное исследование крови и цереброспинальной жидкости (ЦСЖ), нами были сформированы две группы: основная и контрольная.

Основную группу составили 60 больных демиелинизирующими заболеваниями периферической нервной системы от 16 до 80 лет без ограничения по полу и тяжести болезни. В составе группы были выделены две подгруппы: 36 больных острой воспалительной демиелинизирующей полиневропатией (синдром Гийена–Барре) и 24 — хронической воспалительной демиелинизирующей полиневропатией.

Диагноз СГБ устанавливался на основании характерной клинической картины: остро развившийся вялый, относительно симметричный, пара- или тетрапарез, сопровождающийся снижением или выпадением глубоких рефлексов. У подавляющего большинства больных наблюдались нарушения поверхностной и глубокой чувствительности. У трети больных отмечались признаки поражения черепно-мозговых нервов и вегетативные нарушения. Прогрессирование болезни длилось не более четырех недель, и восстановление начиналось через 2–4 недели после достижения фазы плато.

Диагноз ХВДП устанавливался при нарастании мышечной слабости в конечностях, длящейся более 8 недель, с эпизодами нарастания и снижения мышечной силы, или при монотонно прогрессирующей мышечной слабости без эпизодов улучшения. Подтверждением диагноза, наряду с характерной клинической симптоматикой, также служили типичные изменения, выявленные при электронейромиографии (ЭНМГ), отсутствие патологических изменений на МРТ головного и спинного мозга и белково-клеточная диссоциация в цереброспинальной жидкости.

Распределение пациентов по полу было относительно равномерным, в то время как возрастной пик пришелся на группу 26–45 лет в обеих подгруппах. Относительная однородность групп позволила оперировать средними значениями показателей в ходе дальнейших исследований без учета сочетания этих ведущих демографических признаков.

В контрольную группу вошли 36 клинически здоровых человек от 18 до 65 лет из числа практически здоровых доноров. У обследованных не выявлено сопутствующих хронических заболеваний нервной системы и на момент обследования не определялись какие-либо субъективные и объективные признаки острых заболеваний; в анамнезе не отмечено аллергических реакций и аутоиммунных состояний, а также алкоголизма и наркомании.

Для фракционирования образцов сывороток крови и цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) использовали наборы для профилирования, содержащие магнитные микрочастицы с обращенно-фазовой (MB-HIC 8, MB-HIC 18), слабой катионообменной (MB-WCX) и металлоаффинной (MB-IMAC Cu) поверхностями производства компании Bruker Daltonics (Германия). Фракционирование сывороток крови проводили на специализированном роботе ClinProt robot (Bruker Daltonics, Германия). Масс-спектры получали с использованием времяпролетного МАЛДИ масс-спектрометра Ultraflex (Bruker Daltonics, Германия). Десорбцию образцов осуществляли иррадиацией азотным лазером (длина волны 337 нм), работающим при частоте 25 Гц. Для удаления пиков матрицы использовали максимальный уровень подавления сигнала вплоть до 900 Да. Автоматическую регистрацию масс-спектров проводили в линейном режиме положительно заряженных ионов в диапазоне масс 1–15 кДа. Для калибровки использовали калибровочную смесь, содержащую пептиды и белки в диапазоне масс 1–17 кДа. Для увеличения чувствительности масс-спектрометрической детекции белков и пептидов избыток матрицы удаляли 10 импульсами лазера при мощности 45% с последующей аккумуляцией данных при мощности лазера 27%. Для каждого спектра суммировали результаты 720 лазерных импульсов (по 60 импульсов с 12 различных точек пятна). Суммировали спектры с отношением сигнал/шум > 5 и разрешением > 300.

Иммунологическое исследование крови проводилось методом проточной цитофлуориметрии с использованием проточного цитофлуориметра BD FACSCanto II после автоматизированной пробоподготовки цельной крови в соответствии с инструкциями по применению прибора и моноклональных антител. В качестве моноклональных антител был использован набор BD Multitest 6-Color TBNK Reagent, содержащий в своем составе anti-CD3 (FITC), anti-CD16/CD56 (PE), anti-CD45 (PerCP-Cy5.5), anti-CD4 (PE-Cy7), anti-CD19 (APC), anti-CD8 (APC-Cy7). В сыворотке крови методом иммуноферментного анализа проводилось определение уровней IgM, IgG, IgA, IgE, а также антител к ганглиозидам (асиало-GM1, GM1, GM2, GD1a, GD1b, GQ1b). Для определения вышеуказанных антител к ганглиозидам использовали набор BUHLMANN GanglioCombi EIA.

Результаты и их обсуждение

В результате сравнения масс-спектрометрических профилей образцов сыворотки крови, предварительно фракционированных на магнитных микрочастицах различного типа, мы остановили свой выбор на микрочастицах со слабой катионообменной поверхностью MB-WCX как обеспечивающих регистрацию наибольшего количества, по сравнению с другими типами частиц, масс-спектрометрических пиков (рис. 1).

На группе контрольных образцов (n = 36) отработан стандартный протокол получения образцов сыворотки крови и ЦСЖ человека для последующего фракционирования белковой фракции данных образцов на магнитных микрочастицах со слабой катионообменной поверхностью. Согласно разработанному лабораторному протоколу сформирован банк образцов сыворотки крови и ЦСЖ больных демиелинизирующими полиневропатиями, практически здоровых доноров и интактной ЦСЖ. Дальнейшие пилотные исследования позволили накопить воспроизводимые масс-спектры вышеуказанных образцов.

При анализе полученных данных выявлены статистически значимые различия масс-спектров, полученных от сывороток крови пациентов с демиелинизирующими полиневропатиями, и масс-спектров, полученных от практически здоровых доноров, что проявилось в высоких значениях специфичности (98,6%; кросс-валидация — 99,35%) и чувствительности (100%; кросс-валидация — 99,26%) построенной на этом массиве данных классификационной модели (рис. 2).

При масс-спектрометрическом профилировании ЦСЖ количество детектируемых в образцах пиков значительно уступало количеству пиков, наблюдаемых в масс-спектрах образцов сыворотки крови. Предварительные исследования образцов ЦСЖ, полученных от больных демиелинизирующими полиневропатиями и практически здоровых людей, достоверных отличий в масс-спектрометрических профилях образцов ЦСЖ этих групп не выявили (рис. 3).

Изучение иммунограмм и серологических данных у больных СГБ проводилось в сравнительном аспекте при сопоставлении с показателями здоровых людей и больных ХВДП, а также в динамике периода нарастания симптоматики (первые четыре недели болезни), путем анализа результатов исследования при острой воспалительной демиелинизирующей полиневропатии и аксональных формах СГБ.

Результаты статистического анализа иммунологических данных в основной группе и группах сравнения показали, что, несмотря на значительные отличия от контроля, иммунограммы больных СГБ и ХВДП на уровне средних значений достоверно не отличаются друг от друга, хотя тенденции по более значительному отклонению числа активированных (CD3+/HLA-DR+) клеток и содержанию IgE в крови имеются. Существенные различия (р

Н. Д. Ющук*, доктор медицинских наук, профессор, академик РАМН
О. Л. Тимченко*, кандидат медицинских наук
Е. А. Морозова*
И. П. Балмасова*, доктор медицинских наук, профессор
М. М. Гультяев*, кандидат медицинских наук
В. М. Говорун**, доктор биологических наук, профессор
Р. Х. Зиганшин***, кандидат химических наук
Л. Н. Икрянникова**, кандидат химических наук
Е. Н. Ильина**, кандидат биологических наук, доцент
Е. А. Климова*, доктор медицинских наук, профессор
С. В. Манжеева*
М. А. Пирадов****, доктор медицинских наук, профессор
Н. А. Супонева****, кандидат медицинских наук
Ю. А. Федькина*

* ГОУ ВПО МГМСУ Росздрава, Москва
** ФГУ НИИ ФХМ ФМБА России, Москва
*** ИБХ им. академиков М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН, Москва
**** НЦН РАМН, Москва

Ключевые слова: синдром Гийена–Барре, хроническая воспалительная демиелинизирующая полиневропатия, острая воспалительная демиелинизирующая полиневропатия, острая моторная аксональная невропатия, острая моторно-сенсорная аксональная невропатия, аутоантитела к ганглиозидам, постгеномные методы, протеомные исследования, фракционирование, магнитные микрочастицы, катионообменная поверхность, времяпролетная МАЛДИ масс-спектрометрия, масс-спектрометрический анализ, иммунологическое исследование, пилотные исследования.

Источник

Ат к миелину igg 1 10 что значит

ФГБНУ «Научный центр неврологии», Москва, Россия

ФГБНУ «Научный центр неврологии», Москва, Россия

ФГБНУ «Научный центр неврологии», Москва, Россия

Научный центр неврологии РАМН, Москва

Научный центр неврологии РАМН, Москва

Диагностическое значение антител к миелин-олигодендроцитарному гликопротеину при демиелинизирующих заболеваниях центральной нервной системы

Журнал: Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. Спецвыпуски. 2019;119(2-2): 18-23

Щепарева М. Е., Кочергин И. А., Толпеева О. А., Шабалина А. А., Захарова М. Н. Диагностическое значение антител к миелин-олигодендроцитарному гликопротеину при демиелинизирующих заболеваниях центральной нервной системы. Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. Спецвыпуски. 2019;119(2-2):18-23.
Shchepareva M E, Kochergin I A, Tolpeeva O A, Shabalina A A, Zakharova M N. Diagnostic value of antibodies to myelin oligodendrocyte glycoprotein in demyelinating diseases of the central nervous system. Zhurnal Nevrologii i Psikhiatrii imeni S.S. Korsakova. 2019;119(2-2):18-23.
https://doi.org/10.17116/jnevro20191192218

ФГБНУ «Научный центр неврологии», Москва, Россия

Цель исследования. Оценка диагностического значения антител к миелин-олигодендроцитарному гликопротеину (MOG-IgG) при рассеянном склерозе (РС) и остром рассеянном энцефаломиелите (ОРЭМ). Материал и методы. Обследовали 29 пациентов с достоверным РС согласно критериям МакДоналда (2010) (ремиттирующее течение — у 21, вторично-прогрессирующее — у 8), 7 пациентов с ОРЭМ, подтвержденным клиническими и инструментальными данными, и 27 здоровых. Всем пациентам в сыворотке крови, а также 22 пациентам с РС, 6 пациентам с ОРЭМ и 8 здоровым в цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) проводилось определение MOG-IgG методом иммуноферментного анализа. Результаты и заключение. Уровень MOG-IgG в сыворотке крови значимо не различался между группами пациентов с РС и ОРЭМ, однако был статистически значимо выше у больных, чем в контроле. При анализе уровня MOG-IgG в ЦСЖ статистически значимых различий между тремя группами не было выявлено. Чувствительность определения MOG-IgG в сыворотке крови у пациентов с РС составила 75,8%, специфичность — 92,59%. MOG-IgG определяются в сыворотке крови и ЦСЖ у пациентов с демиелинизирующими заболеваниями, что может свидетельствовать об их патогенетической значимости в развитии РС и ОРЭМ. Содержание MOG-IgG в сыворотке крови может быть ценным биомаркером при демиелинизирующих заболеваниях, однако требуются дальнейшие исследования в большей популяции пациентов с этими заболеваниями.

ФГБНУ «Научный центр неврологии», Москва, Россия

ФГБНУ «Научный центр неврологии», Москва, Россия

ФГБНУ «Научный центр неврологии», Москва, Россия

Научный центр неврологии РАМН, Москва

Научный центр неврологии РАМН, Москва

Ранее считалось, что эти антитела преимущественно вовлечены в патогенез рассеянного склероза (РС), однако на основании новых данных, полученных благодаря методу детекции антител с использованием клеточной презентации антигена, было показано, что помимо РС, антитела к нативному МОG выявляются при широком спектре воспалительных заболеваний нервной системы: оптическом неврите, миелите, стволовом энцефалите, остром рассеянном энцефаломиелите (ОРЭМ). Аналогичные результаты получены и при гистохимических исследованиях, показавших, что для MOG-IgG-опосредованного воспаления характерен II тип демиелинизации с активным вовлечением системы комплемента [4].

На основании полученных данных было предложено выделить патологические состояния, ассоциированные с MOG-IgG, в отдельную нозологическую форму — MOG-IgG-энцефаломиелиты. Для этой патологии характерен собственный спектр клинических проявлений. Как и для РС, для MOG-IgG-энцефаломиелитов характерно ремиттирующее течение. До 1/3 таких пациентов соответствуют критериям диагностики Р.С. Прекращение терапии кортикостероидами при MOG-IgG-энцефаломиелитах зачастую приводит к развитию обострений и требует тщательного динамического наблюдения за пациентами и индивидуального подбора курса лечения. Применение плазмафереза, иммуноабсорбции, анти-B-клеточных препаратов эффективно при этой патологии, в то время как использование препаратов, изменяющих течение рассеянного склероза (ПИТРС), неэффективно или приводит к ухудшению течения заболевания. Аналогичный ответ на терапию ПИТРС был ранее выявлен и при демиелинизации, ассоциированной с антителами к аквапорину-4, которую в настоящее время выделяют в отдельную нозологическую форму — заболевания спектра расстройств оптиконевромиелита [7, 8].

Таким образом, проведение скринингового обследования на наличие MOG-IgG у пациентов с различными демиелинизирующими заболеваниями позволит уточнить диагноз и скорректировать терапию. Тем не менее использование высокоспецифичного диагностического теста в широкой популяции может привести к получению большого числа ложноположительных результатов. В связи с этим первоначально целесообразно проведение оценки чувствительности и специфичности методики определения MOG-IgG у пациентов с различными демиелинизирующими заболеваниями ЦНС.

Цель исследования — оценка диагностического значения MOG-IgG-антител при РС и ОРЭМ.

Материал и методы

Обследовали 29 пациентов с РС (ремиттирующее течение (РРС) — у 21, вторично-прогрессирующее течение (ВПРС) — у 8) (основная группа), 7 пациентов с ОРЭМ (группа сравнения) и 27 здоровых (контрольная группа). Группы не отличались статистически значимо (p>0,05) по половозрастным характеристикам (табл. 1). Таблица 1. Демографическая характеристика обследованных пациентов с РС, ОРЭМ и группы контроля

Критерием включения в группу пациентов с РС был диагноз «достоверный РС» согласно критериям МакДоналда (2010) и отсутствие других неврологических заболеваний. Критерием включения в группу сравнения было наличие достоверного диагноза ОРЭМ, подтвержденного результатами инструментального обследования. Критерием включения в контрольную группу было отсутствие неврологических заболеваний. Общими критериями включения для трех групп были возраст от 18 до 65 лет, наличие информированного согласия на участие в исследовании, отсутствие онкологических, системных аутоиммунных, тяжелых соматических заболеваний, а также инфекционного заболевания в течение месяца до забора материала, отсутствие беременности, окончание приема препаратов для иммунотерапии за 6 мес до включения в исследование, отсутствие анамнестических данных о приеме цитостатиков.

Критерием исключения для трех групп было появление клинических или лабораторных признаков аутоиммунного или онкологического заболевания в течение 6 мес после забора материала. За время исследования из контрольной группы выбыл 1 участник, у которого вскоре после забора биологического материала выявили аутоиммунное заболевание.

Исследование было одобрено локальным этическим комитетом Научного центра неврологии.

У пациентов основной группы и группы сравнения оценивались такие клинические характеристики, как наличие активности и тип течения заболевания, частота обострений, число обострений, длительность заболевания, длительность первой ремиссии, выраженность неврологического дефицита по расширенной шкале инвалидизации (Expanded Disability Status Scale — EDSS).

У 22 больных РС, 6 пациентов с ОРЭМ и у 8 здоровых проводили забор ЦСЖ в рамках планового диагностического обследования. У всех пациентов и здоровых брали кровь из кубитальной вены в пробирки с активатором свертывания. В течение 4 ч после забора пробирки центрифугировались при 2000 об/мин в течение 10 мин. Сыворотка и ЦСЖ разделялись на аликвоты объемом 150 мкл в пробирки объемом 0,2 мл. Пробирки маркировались, замораживались и хранились при температуре –70 °C до использования. Забор, первичную обработку и хранение крови и ЦСЖ осуществляли в соответствии с протоколом, разработанным C. Teunissen и соавт. [9].

В сыворотке крови и ЦСЖ определяли MOG-IgG методом ELISA на спектрофотометре («Perkin Elmer», Финляндия) с использованием готовых лабораторных наборов по стандартной методике, рекомендованной производителем (CSB-E13355h, «Cusabio Technology LLC», США).

Для статистической обработки результатов применяли программы Statistica 10.0 («StatSoft», США) и GraphPad Prism 7.0 («GraphPad Software», США). Перед началом проведения анализа проверяли соответствие данных нормальному распределению при помощи критерия Шапиро—Уилка. Учитывая, что распределение данных отличалось от нормального, в дальнейшей работе использовали непараметрические методы. Данные представлены в виде медианы, нижнего и верхнего квартилей (Me [LQ; HQ]). Определение статистической значимости различий между тремя группами при сравнении по количественному признаку проводили с помощью непараметрического критерия Краскела—Уоллиса с последующим попарным сравнением с применением критерия Манна—Уитни. Ошибки множественных сравнений избегали, применяя поправку Бонферрони. Для определения диагностической ценности параметров использовали ROC-анализ, для оценки корреляции — непараметрический метод Спирмена (R). Различия считали статистически значимыми при уровне ошибки p Рис. 1. Уровень MOG-IgG в сыворотке крови (а) и ЦСЖ (б) пациентов с РС, ОРЭМ и здоровых. * — статистически значимые различия по сравнению с контрольной группой при p

Уровень MOG-IgG в ЦСЖ у больных РС составил 15,1 [12,3; 30,4] ЕД/мл, ОРЭМ — 22,1 [21,3; 46,4] ЕД/мл, в контрольной группе — 25,3 [11,4; 61,4] ЕД/мл. Не было обнаружено статистически значимых различий уровня MOG-IgG в ЦСЖ между группами пациентов (см. рис. 1, б).

Содержание MOG-IgG в сыворотке крови при разных типах течения РС

Сравнивали уровни MOG-IgG при РРС и ВПРС. У пациентов с РРС уровень MOG-IgG составил 29,8 [20; 68] ЕД/мл, с ВПРС — 30,3 [23,8; 80,2] ЕД/мл. Не было выявлено статистически значимого различия данного параметра между группами РРС и ВПРС. При этом уровень MOG-IgG в обеих подгруппах пациентов с РС был статистически значимо выше, чем в контрольной группе (p Таблица 2. Различие уровня MOG-IgG в сыворотке крови и ЦСЖ пациентов с РРС в стадии обострения и ремиссии и в контрольной группе Примечание. * — статистически значимые различия по сравнению с контрольной группой при p

Оценка диагностического значения уровня MOG-IgG

Для исследования возможности использования уровня MOG-IgG для диагностики РС был проведен ROC-анализ. В анализе не учитывались данные пациентов с ОРЭМ в связи с малым размером выборки этой группы. Результаты ROC-анализа представлены в табл. 3. Таблица 3. Результаты корреляционного анализа уровня MOG-IgG в сыворотке крови и ЦСЖ и клинических характеристик пациентов с РС Уровень MOG-IgG в сыворотке крови обладал очень хорошей диагностической значимостью. Применение этого параметра при пороге отсечения более 21 ЕД/мл позволило поставить диагноз с чувствительностью 75,8% и специфичностью 92,59% (AUC 0,885; 95% ДИ 0,772—0,955; p Рис. 2. ROC-кривые для уровня MOG-IgG в сыворотке крови (а) и ЦСЖ (б). По оси ординат — чувствительность (%); по оси абсцисс — специфичность (%).

Связь уровня MOG-IgG в сыворотке крови и клинических характеристик пациентов с РС

При анализе зависимости уровня MOG-IgG в ЦСЖ от MOG-IgG в сыворотке крови не было получено статистически значимого результата (R=0,214; p=0,257). При оценке зависимости уровня MOG-IgG в сыворотке крови наблюдались статистически значимые корреляции с продолжительностью заболевания, частотой обострений и оценкой по шкале EDSS. Не было выявлено статистически значимых корреляций между уровнем MOG-IgG в сыворотке крови и возрастом, уровнем MOG-IgG в ЦСЖ и возрастом, продолжительностью заболевания, частотой обострений и оценке по шкале EDSS (табл. 3).

Обсуждение

В отличие от аквапоринов, которые встречаются как в ЦНС, так и в других тканях, МОG экспрессируется только в ЦНС [10]. Аналогично ситуации с аквапорином-4, MOG-IgG в основном регистрируются в сыворотке и их интратекального синтеза не наблюдается [11]. Это подтверждает предположение о периферической продукции специфических антител к МОG [12]. Отсюда возникают вопросы: что является периферическим триггером демиелинизации, связанной с MOG-IgG, и как иммунные клетки могут проходить предположительно неповрежденный гематоэнцефалический барьер [13]. Остается также открытым вопрос: является ли образование этих антител первичным или вторичным по отношению к демиелинизации [14]. Исследователи предполагают, что в случае перехода МОG в секретируемую форму, он оказывается в ЦСЖ, а затем на периферии, в итоге развивается аутоиммунный ответ. В настоящей работе MOG-IgG были выявлены у пациентов с РС и ОРЭМ в сыворотке крови, при этом в ЦСЖ у пациентов с РС и ОРЭМ уровень этого маркера не отличался от контрольной группы, что согласуется с данными литературы [15] и свидетельствует в пользу развития аутоиммунного ответа на периферии.

В нашем исследовании не было выявлено различий в уровне MOG-IgG у пациентов с РРС и ВПРС, а также в периоды обострений и ремиссии, что не противоречит результатам исследований, проведенных ранее. Согласно данным литературы, индивидуальные титры уровня MOG-IgG могут колебаться в зависимости от активности заболевания и лечения, однако зачастую они регистрируются на всем протяжении заболевания [15]. В проведенном исследовании [7] была показана специфичность MOG-IgG для РС, однако результаты по прогностической значимости этого маркера были противоречивы. Для MOG-IgG в настоящем исследовании были выявлены чувствительность 75,8% и специфичность 92,59%, что свидетельствует о его потенциально высоком диагностическом значении при РС. О патогенетической значимости MOG-IgG может свидетельствовать выявление связи уровня MOG-IgG с продолжительностью заболевания, частотой обострений и оценкой по шкале EDSS [16].

Было высказано предположение, что взрослые пациенты с положительными MOG-IgG формируют особую группу РС и оптикомиелита, характеризующую совершенно новое заболевание. В литературе появляется все больше доказательств того, что пациенты, положительные по MOG-IgG-антителам, часто клинически манифестируют с поражения зрительного нерва и сочетания оптического неврита с миелитом, которые сложно поддаются обычному лечению и часто имеют рецидивирующий характер течения. Исходя из полученных данных, исследователи предложили выделять отдельно демиелинизирующие расстройства, связанные с наличием в сыворотке положительных антител к МОG. Эта группа находится на стыке различных демиелинизирующих заболеваний (рис. 3). Рис. 3. MOG-IgG-энцефаломиелиты в общей структуре демиелинизирующих заболеваний. Имеются данные о том, что в некоторых случаях MOG-IgG-ассоциированных расстройств ПИТРС могут быть не только неэффективны, но и опасны, что является аргументом в пользу дальнейшего изучения вклада этого маркера в развитие демиелинизирующих заболеваний и введения анализа на MOG-IgG в повседневную практику невролога [7].

Результаты настоящей работы показали, что антитела MOG-IgG определяются в биологических жидкостях у пациентов с демиелинизирующими заболеваниями. Это может свидетельствовать об их патогенетической значимости в развитии РС и ОРЭМ. Кроме того, была выявлена диагностическая значимость определения MOG-IgG в сыворотке крови у пациентов с Р.С. Таким образом, MOG-IgG в сыворотке крови могут являться ценным биомаркером при демиелинизирующих заболеваниях, однако требуются дальнейшие исследования в большей популяции пациентов с этими заболеваниями.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Источник